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鸭源生物制品外源病毒检测方法
发布:百检网         阅读:1023         日期:2024-12-27

检测产品项目

主要针对鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒 Ⅰ 型、鸭坦布苏病毒、番鸭细小病毒、番鸭小鹅瘟病毒这几种病毒对鸭源生物制品(活疫苗及生产毒种)进行外源病毒检测。


标准

规定了用鸡进行鸭源生物制品外源病毒检测的方法,包括免疫血清的制备及采集、抗体检测、外源病毒检验结果综合判定等内容,适用于鸭源生物制品(活疫苗及生产毒种)中外源病毒的检测。


方法

  1. 免疫血清的制备及采集:按照规定的方法制备和采集针对鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒 Ⅰ 型、鸭坦布苏病毒、番鸭细小病毒、番鸭小鹅瘟病毒的免疫血清,用于后续的抗体检测和结果判定。

  2. 抗体检测

    • 鸭瘟病毒(DPV)ELISA:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,取抗原包被板,分别将阴性对照血清、鸭瘟病毒阳性对照血清和稀释好的待检血清加入到抗原包被板孔中,经过孵育、洗涤、与鸭瘟病毒单克隆抗体作用、再次洗涤、与酶标抗体作用、洗涤、显色、终止等步骤后,在酶标仪在 OD450nm 波长下测定各孔 OD 值。当阴性血清对照孔平均 OD450nm 值大于或等于 0.8,且阳性对照孔的阳断率(PD)大于或等于 50%,判定检测结果有效。

    • 鸭肝炎病毒 Ⅰ 型(DHVⅠ)中和试验:将待检样品与鸭肝炎病毒 Ⅰ 型标准阳性血清混合,接种鸡胚或细胞,观察鸡胚或细胞的病变情况,根据中和指数判断样品中是否含有鸭肝炎病毒 Ⅰ 型外源病毒。

    • 鸭坦布苏病毒(DTMUV)血凝抑制试验:通过检测待检血清对鸭坦布苏病毒血凝活性的抑制作用,判断样品中是否存在鸭坦布苏病毒外源病毒。

    • 鸭坦布苏病毒(DTMUV)ELISA:采用 ELISA 方法检测鸭坦布苏病毒抗体,具体步骤与鸭瘟病毒 ELISA 类似。

    • 番鸭细小病毒(MPV)胶乳凝集抑制试验:利用番鸭细小病毒抗体与胶乳颗粒标记的番鸭细小病毒抗原的特异性结合反应,通过观察胶乳凝集现象的抑制情况,判断样品中是否含有番鸭细小病毒外源病毒。

    • 番鸭小鹅瘟病毒(GPV)胶乳凝集抑制试验:方法同番鸭细小病毒胶乳凝集抑制试验,用于检测番鸭小鹅瘟病毒外源病毒。

  3. 外源病毒检验结果综合判定:根据上述各项抗体检测的结果,综合判断鸭源生物制品中是否存在外源病毒。如果各项检测结果均为阴性,且对照试验成立,则判定该鸭源生物制品外源病毒检测合格;如果有任何一项检测结果为阳性,则判定该制品不合格。



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