检测产品项目

• 病原检测：主要针对羊泰勒虫病的病原吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫进行检测。

• 隐性感染检测：通过检测手段判断羊是否存在泰勒虫隐性感染。

• 临床病例诊断：对出现临床症状的羊进行诊断，确定是否患有羊泰勒虫病。

标准

本标准规定了羊泰勒虫病的临床诊断和综合判定的技术要求。适用于羊泰勒虫病病原检测、泰勒虫隐性感染及临床病例的诊断。

方法

• 血涂片显微镜检测：

• 采样：采集羊的血液或淋巴结穿刺液，制成涂片。

• 染色：常用姬姆萨染色法或瑞氏染色法对涂片进行染色。

• 镜检：在显微镜下观察涂片，寻找泰勒虫的虫体。吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫主要寄生于羊的淋巴细胞、巨噬细胞或红细胞内，虫体呈圆形、椭圆形或梨形等，大小不一，细胞质呈淡蓝色，细胞核呈紫红色。

• 聚合酶链式反应（PCR）检测：

• 采样：采集羊的血液、组织等样本，提取其中的 DNA。

• 引物设计：根据羊泰勒虫的特定基因序列设计引物，如针对吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫的特异性引物。

• PCR 反应：将提取的 DNA 作为模板，加入引物、dNTP、Taq 酶等反应成分，进行 PCR 扩增。反应条件一般包括预变性、变性、退火、延伸等步骤，具体参数根据引物和模板的特性进行优化。

• 结果分析：通过琼脂糖凝胶电泳或荧光定量 PCR 等方法对 PCR 产物进行分析。如果扩增出预期大小的特异性条带或荧光信号达到一定阈值，则判断为阳性。

• 血清学检测：

• 间接免疫荧光试验（IFA）：将羊泰勒虫抗原固定在载玻片上，与待检羊血清反应，然后加入荧光标记的二抗，在荧光显微镜下观察。如果出现特异性荧光，则表明羊血清中含有泰勒虫抗体，可能感染过泰勒虫。

• 酶联免疫吸附试验（ELISA）：将羊泰勒虫抗原包被在酶标板上，与待检羊血清反应，然后加入酶标记的二抗，通过酶催化底物显色，用酶标仪测定吸光度值。根据标准曲线或临界值判断羊是否感染泰勒虫。

• 胶体金免疫层析试纸条（ICS）：将羊泰勒虫抗体或抗原固定在试纸条上，当待检样品中的泰勒虫抗原或抗体与试纸条上的相应物质结合后，会出现显色条带，根据条带的有无和颜色深浅判断结果。